O157顯色培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)操作步驟都了解清楚了嗎
更新時(shí)間:2020-05-15 | 點(diǎn)擊率:1087
O157顯色培養(yǎng)基用于食品、病人糞便樣品中O157:H7菌的快速檢測。O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色,菌落周圍有藍(lán)色暈圈;其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色。本培養(yǎng)基的特異性高,可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽性和假陰性結(jié)果,是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。
O157顯色培養(yǎng)基的原理
混合的顯色底物區(qū)分大腸桿菌和大腸桿菌O157:H7。山梨醇是可發(fā)酵的碳水化合物
大腸桿菌——藍(lán)綠色
大腸桿菌O157:H7——深紫色至洋紅色
克雷伯氏菌——無色至藍(lán)色,黏液狀
綠膿桿菌——無色
月桂基硫酸鈉和膽鹽混合物增加選擇性——革蘭氏陽性菌被抑制
FD052——抑制氣單胞菌屬和普羅威登斯菌屬
O157顯色培養(yǎng)基的操作
稱取瓶內(nèi)干粉,用1000ml蒸餾水或純水溶解,可按29.2g/L的比例擴(kuò)大或縮小。
將上述干粉緩慢倒入蒸餾水中,充分?jǐn)嚢枞芙狻?/div>
加熱至100℃,并按常規(guī)不斷攪拌。如果用高壓滅菌鍋,不要加壓,加熱不能超過100℃?;旌衔镆部梢栽谖⒉t內(nèi)加熱,煮沸后,立即移出微波爐并輕輕攪拌,而后再移入微波爐繼續(xù)加熱,直至瓊脂等*溶解(大量氣泡代替泡沫產(chǎn)生,大約需要2分鐘)。
將培養(yǎng)基冷卻至45-50℃后,傾倒于培養(yǎng)皿或試管中。
注1:如果需要選擇性更強(qiáng)的培養(yǎng)基,可在48℃時(shí)加入亞碲酸鉀溶液,使終濃度為2.5mg/l。
注2:如果標(biāo)本中含有較多的變形桿菌,可在48℃時(shí)加入頭孢克肟,使其終濃度為0.025mg/l。
注3:如果標(biāo)本中含有較多的假單胞菌和/或氣單胞菌,可在48℃時(shí)加入西蘇羅錠(頭孢磺碇),使其終濃度為5mg/l。
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