胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中,一種重要的添加成分,中含有諸多細(xì)胞生長因子,維生素,氨基酸等物質(zhì),在細(xì)胞貼壁、生長、繁殖過程中,發(fā)揮著重要作用。
我們常會(huì)看到,胎牛血清的標(biāo)注上,有對(duì)產(chǎn)品滅活也有沒有滅活的。在我們的常規(guī)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,胎牛血清究竟要不要滅活?本期內(nèi)容將做詳細(xì)解答。
01
血清的滅活指的是什么?
一般情況下,血清的滅活是在血清解凍后進(jìn)行的,通過水浴加熱的方式來處理,溫度和時(shí)間控制在56℃加熱30分鐘或40℃加熱20分鐘。
02
為什么有的血清需要熱滅活?
很多人會(huì)認(rèn)為,血清的熱滅活是為了殺滅血清中的細(xì)菌和病毒等微生物,其實(shí)不然。正規(guī)且合格的血清,會(huì)嚴(yán)格監(jiān)控血清中的微生物指標(biāo),理論上,用戶買到手的血清,都是無菌的、解凍后可直接使用的。
熱滅活顯然不是針對(duì)病原微生物,而是為了滅活血清中的補(bǔ)體。
補(bǔ)體是一種血清蛋白質(zhì),存在于人和脊椎動(dòng)物血清及組織液中,不耐熱,可組成龐大的補(bǔ)體系統(tǒng),可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞過程,刺激平滑肌收縮、細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。因此,如果你的實(shí)驗(yàn)涉及以下這些情況時(shí),建議去除血清可能帶來的補(bǔ)體系統(tǒng)的干擾。
1、免疫學(xué)研究
2、誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化
3、利用昆蟲細(xì)胞研究病毒感染
4、培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞
5、其他補(bǔ)體參與的細(xì)胞培養(yǎng)過程
因此,當(dāng)涉及到一些對(duì)補(bǔ)體比較敏感實(shí)驗(yàn)、且血清中補(bǔ)體濃度相對(duì)比較高,可能存在對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響時(shí),需要考慮對(duì)血清進(jìn)行熱滅活。
03
胎牛血清是否需要熱滅活?
正規(guī)的胎牛血清,要求對(duì)5-8月胎齡(一般牛在10個(gè)月左右足月,后自然分娩)的胎牛采用心臟穿刺的方法采血,隨后進(jìn)行其他制備步驟,得到胎牛血清。因此:
靠譜的胎牛血清,沒有形成一個(gè)完整的補(bǔ)體系統(tǒng),不會(huì)真正地干預(yù)免疫!
血清的最佳工作溫度一般是在37℃左右,所以熱滅火對(duì)于血清而言,也是一種不小的傷害,會(huì)導(dǎo)致一些營養(yǎng)成分流失,進(jìn)而影響細(xì)胞狀態(tài)。所以常規(guī)實(shí)驗(yàn)中,選擇合規(guī)的胎牛血清,無需對(duì)血清進(jìn)行熱滅活。
如果實(shí)驗(yàn)中涉及到一些其他特殊的“神秘活性物質(zhì)",必須要滅活,根據(jù)血清廠家多年來總結(jié)的經(jīng)驗(yàn),常規(guī)解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠盡可能多地保留營養(yǎng)成分。
Cell Culture
細(xì)胞培養(yǎng)好物推薦
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胎牛血清常規(guī)使用過程中,無需熱滅活的前提是,胎牛血清的采血時(shí)間嚴(yán)格控制在5-8月齡、生產(chǎn)流程、包裝運(yùn)輸?shù)冗^程符合規(guī)范要求。因此,選擇一款合格的胎牛血清,對(duì)于實(shí)驗(yàn)而言是十分重要的。
Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,澳洲血源,將經(jīng)過初步檢測(cè)合格的很多供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經(jīng)七次加壓過濾,最后三次為0.1 µm無菌過濾處理,得到胎牛血清。
同一批次血清質(zhì)量上基本無差異。不同廠家一個(gè)批次產(chǎn)量差異較大,從100升到2000升不等。批次大,更利于試驗(yàn)的穩(wěn)定和連續(xù)的可參照性。
所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,每個(gè)批次附有詳細(xì)完整的《檢測(cè)報(bào)告》。
Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清的優(yōu)勢(shì):
1>精選內(nèi)毒素更低批次(≤3EU/ml)澳洲血源。是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的穩(wěn)定供應(yīng)品牌。
2>新批次在試用前,提供試用服務(wù),養(yǎng)細(xì)胞更放心。
3>每個(gè)批次產(chǎn)量2000-3000瓶,試用滿意的實(shí)驗(yàn)室批號(hào)優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項(xiàng)目兩年不需換批次,細(xì)胞試驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。
4>每年按廠家生產(chǎn)順序,會(huì)有多批次平行供應(yīng),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室專屬批號(hào)管理,保證供貨穩(wěn)定。
5>為Ausbian®血清用戶免費(fèi)提供申報(bào)支持,具有完整的檢測(cè)報(bào)告,為各類項(xiàng)目的申報(bào)提供支持。
6>針對(duì)特殊科研項(xiàng)目,可提供3-5個(gè)平行批次,讓試驗(yàn)人有更多選擇空間。
7>為Ausbian®血清提供免費(fèi)代儲(chǔ)存服務(wù),為儲(chǔ)存空間不足的實(shí)驗(yàn)室提供可靠的血清倉儲(chǔ)保護(hù),按要求隨時(shí)發(fā)貨。
8>Ausbian®血清從出廠,到實(shí)驗(yàn)室,全程低溫冷鏈保護(hù),確保血清無反復(fù)凍融。
9>免費(fèi)真品保障,每個(gè)血清瓶身加貼Viansaga®易破損防偽標(biāo)簽,Ausbian®品牌真品保護(hù),逢假必究,為實(shí)驗(yàn)室做好售后保障。
10>免費(fèi)無憂售后,所有實(shí)驗(yàn)室簽收的Ausbian®胎牛血清,從簽收日開始計(jì)算,一年之內(nèi),血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。
11> 免費(fèi)專業(yè)幫助,匯集近二十年,千萬個(gè)血清用戶細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),為各種細(xì)胞培養(yǎng)提供問題梳理分析,解決方案參考。