血清沉淀從何而來(lái)?
一般來(lái)說(shuō),血清沉淀的成分可以簡(jiǎn)單分為以下幾種:
1、纖維蛋白:最常見(jiàn)的體積比較大的沉淀物,達(dá) 1-2mm,肉眼可見(jiàn)。因?yàn)橐恍┭逶谑占涂焖偬幚磉^(guò)程中,存在纖維蛋白原(可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體),處于溶解狀態(tài),但經(jīng)過(guò)濾分裝后,就會(huì)在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖維蛋白的沉淀。
2、磷酸鈣:會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁的一種沉淀物,并且在 37℃ 培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)增加。這類沉淀物鏡下觀察是一個(gè)小黑點(diǎn),由于布朗運(yùn)動(dòng),它們看上去仿佛可以運(yùn)動(dòng),因此常被誤認(rèn)為是微生物污染。
3、膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì):也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見(jiàn)原因。
剛出廠的血清,應(yīng)該是澄清透明的,為了保證品質(zhì),血清會(huì)儲(chǔ)存在-20℃的環(huán)境中。如果運(yùn)輸過(guò)程中,出現(xiàn)了溫度忽高忽低,反復(fù)凍融的情況,就容易析出大量沉淀。另外,不正確的解凍方法也會(huì)引起血清產(chǎn)生大量沉淀。
血清沉淀會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)嗎?
一般情況下,沉淀物不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng),但如果細(xì)胞對(duì)于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有特殊需求,沉淀物中的成分不能被細(xì)胞吸收,可能會(huì)引起細(xì)胞長(zhǎng)勢(shì)較差。
血清沉淀會(huì)影響細(xì)胞實(shí)驗(yàn)嗎?
會(huì)影響血清過(guò)濾。一些特殊實(shí)驗(yàn)中,需要對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行過(guò)濾,如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物,混入培養(yǎng)基中,會(huì)導(dǎo)致過(guò)濾孔被堵塞,影響過(guò)濾效果。
血清沉淀導(dǎo)致細(xì)胞污染嗎?
一般情況下,正常的沉淀物不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞污染。
但多數(shù)情況下,血清沉淀會(huì)對(duì)我們判斷細(xì)胞是否出現(xiàn)污染造成困擾。
絮狀沉淀容易和真菌、細(xì)菌混淆;磷酸鈣沉淀引起的小黑點(diǎn)容易與支原體污染混淆。
沉淀不是檢驗(yàn)血清的硬指標(biāo),但為了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確、實(shí)驗(yàn)美觀、實(shí)驗(yàn)便利,還是應(yīng)該盡量減少沉淀的產(chǎn)生。掌握正確的血清解凍、使用方法,再加上一款品質(zhì)穩(wěn)定的優(yōu)秀血清,對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),至關(guān)重要。
正確的使用方法與優(yōu)質(zhì)的血清,二者缺一不可。
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