在微生物檢測領(lǐng)域,PCR和qPCR已得到廣泛的應(yīng)用,甚至現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)展到了多重PCR檢測。無論是食品、乳品、制藥工業(yè)、出入境檢驗(yàn)檢疫還是臨床和科研領(lǐng)域,核酸擴(kuò)增檢測都是一種方便、快捷、靈敏的方法。
為保證標(biāo)準(zhǔn)化操作,并和接軌,我國食品、出入境、臨床等行業(yè)也出臺(tái)了PCR和qPCR的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。如GB/T 27403.2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測》提出,在對(duì)方法確認(rèn)時(shí),應(yīng)使用“參考標(biāo)準(zhǔn)或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行校準(zhǔn)”。檢測物種的DNA標(biāo)準(zhǔn)對(duì)PCR就非常重要,不僅可作為陽性對(duì)照,而且可檢測該方法或該試劑盒的靈敏度、特異性、確保PCR方法(PCR儀、試劑盒、操作)的可靠,以及能達(dá)到性能上的要求。
德國著名微生物檢測產(chǎn)品生產(chǎn)商Minerva Biolabs公司提供有一系列的微生物DNA標(biāo)準(zhǔn)品,方便檢測方法的校準(zhǔn),也可作為PCR的陽性對(duì)照,免去用戶自己提取DNA和菌種鑒定的麻煩。
其產(chǎn)品包括如下兩大類:
一、基因組DNA標(biāo)準(zhǔn)品
(英文:Genomic DNA Extracts - Specifity Standards)
它用于PCR方法的特異性檢查。該基因組DNA系抽提而成,來自低傳代數(shù)、物種明確的菌種。DNA經(jīng)部分測序驗(yàn)證,滴度經(jīng)光密度測定(小牛胸腺DNA標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照)。
具體產(chǎn)品見下表:
以上每盒產(chǎn)品含1管菌種基因組DNA(10ng±2 ng,凍干粉)、1管Tris緩沖液(200μl,10mM, pH 8.5)用于溶解DNA。
二、PCR定量標(biāo)準(zhǔn)品
英文:(PCR Quantification Standards)
它也是基因組標(biāo)準(zhǔn)品,但經(jīng)過了嚴(yán)格的定量,每盒產(chǎn)品含1×10∧8基因組(凍干粉),3管2ml Tris緩沖液(10mM,pH8.5,用于溶解DNA),可制備濃度梯度的DNA標(biāo)準(zhǔn)品,從而可繪制qPCR標(biāo)準(zhǔn)曲線,以評(píng)估qPCR檢測方法的性能。
Minerva Biolabs公司簡介
● 世界著名微生物PCR專業(yè)診斷工具生產(chǎn)商,總部位于德國柏林,創(chuàng)始人來自的羅伯特·科赫研究所;
● 自1999年起即研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)和生物藥工業(yè)用QC檢測試劑;
● 配備生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室;
● GMP級(jí)潔凈車間生產(chǎn);
● 支原體PCR檢測試劑供應(yīng)商;
● IOM和PDA成員;
● ISO 9001和ISO 13485認(rèn)證;
2005年,上海締一生物生物科技有限公司作為全國總代理,將Minerva的優(yōu)秀產(chǎn)品引入中國。數(shù)年來,不斷為中國生物研究實(shí)驗(yàn)室,以及眾多工業(yè)企業(yè),提供了完整高效的病原菌、支原體等微生物檢測及祛除解決方案。