在食品和飼料的初級生產(chǎn)階段,以及食品車間環(huán)境中,常需檢查腸桿菌科細(xì)菌的存在和計數(shù)。在《ISO 21528-1:2017 食品和動物飼料的微生物學(xué) 腸桿菌科檢測和計數(shù)的水平法》中,可以看到該標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于腸桿菌科的檢測方法的推薦。
ISO 21528-1:2017取代的是ISO 21528-1:2004,主要是做的方法上的調(diào)整,如原先是用緩沖蛋白胨水(BPW)預(yù)增菌,再用EE肉湯增菌,現(xiàn)在則改用
BPW直接增菌;驗證試驗是用葡萄糖OF培養(yǎng)基,而非葡萄糖瓊脂。該ISO適合兩種情況,一是微生物需要通過增菌來復(fù)蘇,二是預(yù)期微生物數(shù)量小于100/ml(g)樣品。
其大致流程如下:首先將樣品在BPW孵育37℃,18h,再在VRBG培養(yǎng)基上接種,37℃孵育24h±2h,觀察典型菌落(粉紅色菌落)。再選擇可疑菌落,接種至非選擇性培養(yǎng)基如營養(yǎng)瓊脂平板上進行純培養(yǎng),37℃孵育24h±2h。然后挑取一個菌落進行氧化酶試驗。如為陰性。則對該菌落再進行葡萄糖發(fā)酵試驗。葡萄糖發(fā)酵試驗采用的是葡萄糖OF培養(yǎng)基,37℃孵育24h±2h后,如果試管液體變?yōu)辄S色,則為陽性反應(yīng)。
這是即可匯報檢測結(jié)果了。如果不想做上述2種驗證試驗,而且需要進一步對腸桿菌科鑒定到種,則可采用HiMedia公司生產(chǎn)的生化鑒定卡。HiMedia公司至少有2種腸桿菌科生化鑒定卡,一種貨號是KB003品名為Hi25™ Enterobacteriaceae Identification Kit。另一種貨號是KB016,品名為Hi24™ Enterobacteriaceae Identification Kit。 KB003包含25項檢查(含13種傳統(tǒng)生化試驗和含葡萄糖在內(nèi)的11種糖發(fā)酵試驗和1個氧化酶試劑紙片),可鑒定68種腸桿菌。KB016包含24種生化類型,可鑒定65種腸桿菌。KB016和KB003相比,有15種生化反應(yīng)二者重合:
ONPG試驗、賴氨酸脫羧試驗、鳥氨酸脫羧試驗、尿素酶試驗、苯丙氨酸脫氨試驗、伏普試驗、甲基紅試驗、吲哚試驗、七葉苷水解試驗、纖維二糖發(fā)酵試驗、蜜二糖發(fā)酵試驗、蔗糖發(fā)酵試驗、海藻糖發(fā)酵試驗、葡萄糖發(fā)酵試驗、乳糖發(fā)酵試驗、
KB003*的生化反應(yīng)包括:
硝酸鹽還原試驗、H2S產(chǎn)生試驗、檸檬酸利用試驗、丙二酸利用試驗、阿拉伯糖發(fā)酵試驗、木糖發(fā)酵試驗、核糖醇發(fā)酵試驗、鼠李糖發(fā)酵試驗、棉子糖發(fā)酵試驗、氧化酶紙片試驗。
KB016*的生化類型包括:
吡咯烷酮酶試驗、β-葡萄糖醛酸酶試驗、α-半乳糖苷酶試驗、β-木糖酶試驗、山梨醇發(fā)酵試驗、水楊苷發(fā)酵試驗、甘露糖發(fā)酵試驗、麥芽糖發(fā)酵試驗、
在實際腸桿菌科成員的鑒定中,客戶可選擇使用。
HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)和鑒別鑒定產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn),具有WHO GMP認(rèn)證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認(rèn)證,CE認(rèn)證和FDA注冊登記。其產(chǎn)品行銷140多個國家。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來的服務(wù)。