綠膿桿菌在自然界中的水、空氣和土壤中均有存在,可產(chǎn)生多種外毒素和內(nèi)毒素,常引起人皮膚化膿感染。因此,水和化妝品常需檢測(cè)銅綠假單胞菌。在《GB/T 7918.4-1987 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 綠膿桿菌》中規(guī)定,化妝品不得檢出銅綠假單胞菌。
對(duì)銅綠假單胞菌分離選擇用培養(yǎng)基在國(guó)標(biāo)中有具體的規(guī)定。但近年來(lái),隨著顯色培養(yǎng)基的逐步使用,顯色培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)逐漸顯現(xiàn)出來(lái)。它利用細(xì)菌特異性酶與顯色底物發(fā)生反應(yīng),直接通過(guò)菌落有暗色初步鑒別微生物,已成為一種非常實(shí)用的新型快速分離方法。
有人對(duì)傳統(tǒng)分離選擇培養(yǎng)基(如CN選擇培養(yǎng)基,十六烷*基溴化胺瓊脂,乙酰胺瓊脂,CFC瓊脂)進(jìn)行過(guò)檢測(cè)和評(píng)論1,發(fā)現(xiàn)在CN、CFC 培養(yǎng)基上,銅
綠假單胞菌呈黃綠色,惡臭假單胞菌呈黃色,兩類(lèi)菌顏色相近,并不容易區(qū)分,因此會(huì)增大鑒定工作量。十六烷*基溴化銨瓊脂上,銅綠假單胞菌與惡臭假單胞菌形態(tài)顏色均相似,不適宜作為選擇性培養(yǎng)基使用。乙酰胺瓊脂、假單胞菌顯色培養(yǎng)基能明顯將銅綠假單胞與惡臭假單胞菌、熒光假單胞菌區(qū)分開(kāi),但乙酰胺瓊脂上目標(biāo)菌菌落較小,可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察與分離。
因而,作者認(rèn)為,十六烷*基溴化胺瓊脂培養(yǎng)基對(duì)假單胞菌屬特異性較差,CFC 瓊脂選擇性較弱,而乙酰胺瓊脂則存在目標(biāo)菌生長(zhǎng)速度過(guò)慢,增菌時(shí)間長(zhǎng),缺乏時(shí)效性等問(wèn)題,且 CN 選擇性培養(yǎng)基在樣品污染量大時(shí),容易出現(xiàn)菌落成片無(wú)法計(jì)數(shù)的情況。
HiMedia公司開(kāi)發(fā)的綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基,系用熒光法分離銅綠假單胞菌。銅綠假單胞菌分泌幾種色素,包括綠膿素(藍(lán)綠色)、熒光素(黃綠色,發(fā)熒光)、紅膿素(棕紅色)。King等人開(kāi)發(fā)了King A培養(yǎng)基,用于提高綠膿素和紅膿素的產(chǎn)出,以及King B 培養(yǎng)基用于提升熒光素的產(chǎn)出。該顯色培養(yǎng)基用植物源蛋白胨取代動(dòng)物蛋白胨,并基于King 等人的配方而成(熒光混合劑除外)。培養(yǎng)基中的溴棕*銨抑制其他菌群生長(zhǎng)。它作為季銨類(lèi)化合物和陽(yáng)離子表面活性劑,使銅綠假單胞菌之外的細(xì)菌菌體釋放出氮和磷。銅綠假單胞菌裂解熒光底物,使UV下發(fā)射熒光。
在該培養(yǎng)基中,銅綠假單胞菌UV下發(fā)出熒光(下圖),而嗜麥芽窄食單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌均被抑制。
HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn),具有WHO GMP認(rèn)證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認(rèn)證,CE認(rèn)證和FDA注冊(cè)登記,尤其通過(guò)CE的體外診斷注冊(cè)。其產(chǎn)品行銷(xiāo)140多個(gè)國(guó)家。
締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。
參考文獻(xiàn)
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