人類歷*的次培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)所用的添加物是動(dòng)物血清(如新生牛血清、優(yōu)級(jí)胎牛血清等,添加量一般在5%~15%之間)等天然的動(dòng)物體液性補(bǔ)充物。這些天然的體液性補(bǔ)充物可以在較長(zhǎng)的一段時(shí)間里維持細(xì)胞生長(zhǎng)。它們主要是可以向培養(yǎng)細(xì)胞提供激素、生長(zhǎng)因子、貼壁因子、結(jié)合蛋白和其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。然而,盡管血清對(duì)細(xì)胞具有良好的生長(zhǎng)促進(jìn)作用,但使用血清作為培養(yǎng)基的添加劑依然存在很多問題。
高成本和可用性問題
血清作為培養(yǎng)基中的重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)來源,血清可占總體成本的85%~90%。比如在新西蘭等發(fā)達(dá)國(guó)家,其血清成本花費(fèi)高達(dá)500~1000美元/L不等。另外,含血清培養(yǎng)基的可用性也各有不同,特別是對(duì)于那些關(guān)注動(dòng)物福利的國(guó)家,當(dāng)?shù)鼐用駥?duì)動(dòng)物獲得血清的行為極其抵制。
倫理問題
從牛胎兒中獲得血清引起了社會(huì)對(duì)動(dòng)物福利的關(guān)注,如對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造成傷害,存在著道德和倫理上的問題。
血清批間差異問題
季節(jié)的交替、地域的跨越、動(dòng)物個(gè)體或群體的差異,這些不同均會(huì)造成血清的批次間差異。另外,血清的組成存在可變性和不一致性,這也會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞具有不一致的促生長(zhǎng)能力。此外,每批培養(yǎng)基的質(zhì)量會(huì)隨著供體奶牛的飲食和身體狀況的變化而變化。這種變化也會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)特性發(fā)生顯著差異,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)過程的生長(zhǎng)能力和速度的巨大差別。
成分問題
動(dòng)物血清成分復(fù)雜,其包含有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和活性成分。還含有少量的細(xì)胞毒性物質(zhì)和抑制成分,這些成分會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)與表達(dá)。此外,在生物反應(yīng)器中生長(zhǎng)的細(xì)胞通常是將目標(biāo)產(chǎn)物(一般是蛋白質(zhì))分泌到培養(yǎng)基質(zhì)中。
高污染風(fēng)險(xiǎn)問題
污染通常來自存在于動(dòng)物血清中的病毒和支原體以及與牛海綿狀腦病相關(guān)的朊病毒。有研究表明35%~50%的商業(yè)含血清培養(yǎng)基是病毒陽(yáng)性。另有研究表明,來源于肉制品的新型Creutzfeldt-Jakob?。ㄈ祟惏姹镜呐:>d狀腦?。┑陌l(fā)生很大原因要?dú)w咎于培養(yǎng)基中添加了牛血清。雖然被污染的生物制劑可能不會(huì)走向市場(chǎng),但也沒有人想要在制造的生物制藥中冒這種污染的風(fēng)險(xiǎn)去生產(chǎn)。
血清培養(yǎng)基帶來的諸多隱患,逐漸被人們認(rèn)識(shí)。近年來,無血清細(xì)胞培養(yǎng)基逐漸盛行,
締一生物為您介紹一款可無血清培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,基礎(chǔ)培養(yǎng)基M199的改良款,由HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE199系列,該系列有兩款產(chǎn)品SFRE199-1和SFRE199-2。SFRE199系列起初是用于培養(yǎng)狒狒腎Bak細(xì)胞的。
有報(bào)道,在SFRE199-1生長(zhǎng)的原代Bak細(xì)胞的群體二倍分裂時(shí)間(PDT)約為34.2小時(shí),與加有5%牛血清的HLH(含水解乳白蛋白的HBSS)相同,加有3%胎牛血清的M199的PDT為36小時(shí)。如果在SFRE199-1中去除胰島素或硫酸鋅,則細(xì)胞不能融合,PDT延長(zhǎng)。若含有胰島素和硫酸鋅,則其支持生長(zhǎng)的能力相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照血清培養(yǎng)基。
締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)及檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來的服務(wù)。