沙門氏菌是革蘭氏陰性、細(xì)胞內(nèi)寄生的一種腸道菌。不但能引起家畜家禽及其他動(dòng)物發(fā)生急性、慢性或隱性感染,而且還能通過污染食物導(dǎo)致人的食物中毒,對(duì)人類造成很大的威脅。
沙門氏菌是威脅公眾衛(wèi)生安全的一種重要的致病菌,食用了被沙門氏菌污染的食品或者藥品后,能引起人和動(dòng)物中毒并引起多種嚴(yán)重的疾病,因此建立有效快速的檢驗(yàn)方法對(duì)于預(yù)防和控制沙門氏菌病十分重要。
GB4789.4—2016是目前我國(guó)對(duì)食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)依據(jù)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。檢測(cè)步驟如下:預(yù)增菌、增菌、分離、生化試驗(yàn)、血清學(xué)鑒定、血清學(xué)分型(選做項(xiàng)目)。
分離步驟:分別用直徑3mm的接種環(huán)取增菌液1環(huán),劃線接種于一個(gè)BS瓊脂平板和一個(gè)XLD瓊脂平板(或 HE瓊脂平板或沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板),于36℃±1℃分別培養(yǎng)40h~48h(BS瓊脂平板)或18h~24h(XLD瓊脂平板、HE瓊脂平板、沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板),觀察各個(gè)平板上生長(zhǎng)的菌落,各個(gè)平板上的菌落特征見表1。
表1 沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征
選擇性瓊脂平板 | 沙門氏菌 |
BS瓊脂 | 菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色,菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色;有些菌株形成灰綠色的菌落,周圍培養(yǎng)基不變 |
HE瓊脂 | 藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或幾乎全黑色 |
XLD瓊脂 | 菌落呈粉紅色,帶或不帶黑色中心,有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心,或呈現(xiàn)全部黑色的菌落;有些菌株為黃色菌落,帶或不帶黑色中心 |
沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基 | HiMedia沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(貨號(hào):MV1296):沙門氏菌呈淡紫色菌落,并有紫色光暈。大腸桿菌和其他β-葡萄糖醛酸酶陽性菌都顯示為藍(lán)色。其他微生物菌落為無色。 |
顯色培養(yǎng)基,是一類利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理,來檢測(cè)目標(biāo)微生物的新型分離培養(yǎng)基。采用顯色培養(yǎng)基鑒定微生物是在生化反應(yīng)的基礎(chǔ)上開發(fā)的一種新技術(shù),目前也被食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)所認(rèn)可和采用。
由締一生物代理的HiMedia公司顯色培養(yǎng)基,近年來,在上悄然流行。HiMedia Laboratories作為微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,提供有眾多以HiCromeTM為開頭命名的顯色培養(yǎng)基。
在采用國(guó)標(biāo)方法檢測(cè)食品中沙門氏菌時(shí)可選用HiMedia公司沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(貨號(hào):MV1296)。
HiCrome沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(貨號(hào)MV1296)用于分離和鑒別沙門氏菌,與大腸菌群相區(qū)分,具有更高的敏感度。采用植物蛋白胨取代了動(dòng)物蛋白胨,對(duì)Rambach培養(yǎng)基原始配方進(jìn)行了改進(jìn),并用于沙門氏菌與其他腸道菌的鑒別。Rambach的配方,是基于沙門氏菌對(duì)丙二醇的利用以及顯色指示劑的存在。
既往檢測(cè)沙門氏菌的常規(guī)方法,是對(duì)硫化氫產(chǎn)生的檢測(cè)。但其他非沙門氏菌如檸檬酸桿菌、變形桿菌等,也存在這一生化反應(yīng),從而仍需進(jìn)一步的鑒定。而該培養(yǎng)基根據(jù)特異性的酶底物反應(yīng),可對(duì)沙門氏菌一步清晰鑒別。沙門氏菌呈淡紫色菌落,并有紫色光暈。大腸桿菌和其他β-葡萄糖醛酸酶陽性菌都顯示為藍(lán)色。其他微生物菌落為無色。
該培養(yǎng)基中的胃蛋白酶消化的動(dòng)物組織和酵母提取物提供氮源、碳源化合物和其他必要的生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)。膽鹽混合物抑制革蘭氏陽性菌生長(zhǎng)。
HiMedia的顯色培養(yǎng)基生產(chǎn)及產(chǎn)品均通過了 ISO9001、ISO13485、WHO的GMP認(rèn)證、CE和FDA認(rèn)證。其產(chǎn)品行銷140多個(gè)國(guó)家。
締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,會(huì)一如既往地為您帶來的服務(wù)。