李斯特菌是革蘭氏陽性的短桿菌,能游動(dòng),可寄生在細(xì)胞內(nèi)。它包括七個(gè)菌種,其中單核細(xì)胞增生李斯特菌是常見的感染人的腸道病原菌,在我國(guó)是奶制品等食品的常規(guī)檢查項(xiàng)目。事實(shí)上,在肉制品中也常常發(fā)現(xiàn)有一定李斯特菌的污染。雖然它的致病性并不太高,但對(duì)于嬰幼兒以及免疫缺陷的高危人群,它常帶來嚴(yán)重的食品中毒事件。因此,常規(guī)檢查是否存在李斯特菌污染非常重要。
李斯特菌在形態(tài)上容易和鏈球菌、棒狀桿菌相混淆。那么,如何把它鑒別出來呢?國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)中推薦使用顯色培養(yǎng)基進(jìn)行鑒別。小編現(xiàn)在就向你推薦一款質(zhì)量過硬的產(chǎn)品,HiMedia公司(微生物培養(yǎng)基生產(chǎn)商)生產(chǎn)的李斯特菌顯色培養(yǎng)基(HiCrome標(biāo)識(shí),貨號(hào)M1924)。
該培養(yǎng)基是根據(jù)李斯特菌的β-葡萄糖苷酶活性、鼠李糖發(fā)酵特性和磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C(PIPLC)活性進(jìn)行的特異顯色。有β-葡萄糖苷酶活性則菌落為藍(lán)綠色,有鼠李糖發(fā)酵特性則菌落背景為黃色,有PIPLC活性則菌落周圍有不透明光暈。具體菌種特征如下:
菌屬或菌種 | β-葡萄糖苷酶 | 鼠李糖發(fā)酵 | PIPLC |
單核細(xì)胞增生李斯特菌 | 陽性 | 陽性 | 陽性 |
綿羊李斯特菌 | 陽性 | 陰性 | 陽性 |
英諾克李斯特菌 | 陽性 | 陽性 | 陰性 |
其他生長(zhǎng)菌不含β-葡萄糖苷酶活性,為白色菌落。另一些菌則被抑制生長(zhǎng)(如枯草芽胞桿菌ATCC 6633,白色念珠菌ATCC 10231,大腸桿菌ATCC 25922等)。
該培養(yǎng)基需要兩種添加劑,一種為磷脂酰肌醇,用于驗(yàn)證是否存在PIPLC活性;另一種為抗生素組合,用于增加培養(yǎng)基的選擇性。它和培養(yǎng)基的氯化鋰,一起用于大多數(shù)革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌和霉菌的生長(zhǎng)。
該培養(yǎng)基為淡黃色至粉紅色均勻自由流動(dòng)的粉末。用法是在470ml蒸餾水中加入35.14克干粉,加熱至沸騰以*溶解。高壓滅菌15磅(121℃)15分鐘。冷卻至45-50℃。再無菌加入兩管添加劑?;靹蚝蟮谷霟o菌平皿中。制備好的培養(yǎng)基外形為紅色的不透明凝膠。接種后在35-37℃孵育24-48小時(shí),即可觀察顯色反應(yīng)。
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