前面我們說過了如何鑒別胎牛血清的質(zhì)量,但是關(guān)于如何保存胎牛血清,也是很多初次接觸細胞培養(yǎng)的實驗人比較關(guān)注的問題。今天,小編就為大家分享一下關(guān)于胎牛血清的一些常識。
1、 如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
答:血清推薦融化方法(三步法)
| 溫度 | 100ml | 500ml | 1000ml |
*步 | 室溫 | 35min | 90min | 100min |
| 或15-20℃水浴 | 5min | 18min | 20min |
第二步 | 20℃水浴 | 15min | 25min | 30min |
第三步 | 37℃水浴 | 20min | 35min | 45min |
但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2、血清中包含絮狀沉淀是什么,怎么處理?
答:沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
答: 按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清/分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(3)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
4、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
答:一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
Ausbian胎牛血清精選內(nèi)毒素極低,產(chǎn)量大于1600瓶(500毫升)的血清批次,滿足干細胞、基因敲除、原代培養(yǎng)、細胞典藏、長期傳代等各類細胞的培養(yǎng)要求;完整的檢測報告,及滅病毒服務,為各類臨床相關(guān)項目的申報提供完整支持。