牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,其含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)成分,具有促進(jìn)細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞分化等極其重要的生物學(xué)功能。本文締一生物/締一生物為您分析滅能對(duì)新生牛血清有什么影響?
對(duì)新生牛血清進(jìn)行滅能處理可滅活血清中可能污染的病毒、支原體等外源微生物,但也可能使血清內(nèi)含有的細(xì)胞培養(yǎng)所需要的生物活性物質(zhì)變性降解,從而影響細(xì)胞的培養(yǎng)。
武漢生物制品研究所曾對(duì)滅能對(duì)新生牛血清的影響進(jìn)行了研究。他們用照射劑量為8和16kGy 的60Coγ-射線(xiàn)及56℃30min加熱滅能新生牛血清,并和未滅能的新生牛血清分別培養(yǎng)Vero細(xì)胞和MRC-5 細(xì)胞。未滅能的新生牛血清培養(yǎng)的 Vero 細(xì)胞和MRC-5細(xì)胞狀態(tài),與傳代前形態(tài)一致,細(xì)胞呈致密單層;用8和16kGy 60Coγ-射線(xiàn)照射滅能的新生牛血清培養(yǎng)的Vero細(xì)胞和 MRC-5 細(xì)胞數(shù)量較少,每視野下約占 90%;經(jīng) 56 ℃30 min滅能的新生牛血清培養(yǎng)的 Vero 細(xì)胞和 MRC-5 細(xì)胞數(shù)量zui少,每視野下約占 50%。從生長(zhǎng)曲線(xiàn)和倍增時(shí)間上看,未滅能新生牛血清培養(yǎng)的兩種細(xì)胞增殖更多更快速;其次是γ-射線(xiàn)照射滅能的血清,zui后是熱滅能的新生牛血清。
作者認(rèn)為,γ-射線(xiàn)照射滅能和56℃30 min 熱滅能對(duì)新生牛血清中的成分均有一定程度的破壞,其中γ-射線(xiàn)照射對(duì)新生牛血清成分的破壞性較小,56 ℃30 min 熱滅能對(duì)新生牛血清的成分破壞性較大。
因此,如非實(shí)驗(yàn)必要,則無(wú)需對(duì)新生牛血清進(jìn)行熱滅活。
參考文獻(xiàn)
趙新華等. 滅能與未滅能新生牛血清培養(yǎng)細(xì)胞效果的比較. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2015, 28 ( 9): 923